明目地黄胶囊是由熟地黄、菊花、枸杞子、石决明等中药研制而成,具有滋肾、养肝、明目等生理功效。临床主要用于肝肾阴虚,目涩畏光,目视模糊,迎风流泪的症状。中药作为中华医药学的瑰宝日益引起全世界的关注,但由于诸多因素出口占有量不到5 % ,重金属有害元素超标是其中影响因素之一。近年来,有用原子吸收光谱法对大黄和柴胡中的锌、铜、铁等元素进行了测定,其中不包括铅、镉。据报道镉元素有化学致癌作用,进入人体后生成难溶物,影响人体的正�；�,严重者发生休克、死亡。随着中药国际化进程的日益加速,许多国家对进口中药材及其中成药中的重金属含量均有明确规定。为了保证用药安全和有效,我们采用微波消解2石墨炉原子吸收分光光度法测定中明目地黄胶囊重金属镉的含量,取得了满意结果。
1 仪器与试药原子吸收分光光度计,镉空心阴极灯(衡水宁强光源有限公司) ;热解涂层石墨管;WR/ BP25TC 微波消解仪; 镉标准液( GSB G62040290 ,1 000mL ,国家钢铁材料测试中心钢铁研究总院) ; 明目地黄胶囊(广东众生药业股份有限公司) ;硝酸(优级纯广东汕头西陇化工厂) ;H2O2 (分析纯广州越秀区新成精细化工厂) ;其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
211 原子吸收分光光度计的工作条件光源用镉空心阴极灯,波长为22818nm ,灯电流为3mA ,狭缝012mm ,硝酸镁作为基体改进剂,进样体积20μL 。背景校正用氘灯。
212 样品处理 精密称取本品内容物015g ,置于消解罐中,加硝酸5mL ,过氧化氢2mL ,拧紧、密封。然后放到微波消解仪中进行消解,微波消解程序(见表2) 。消解完成后,置电热板上缓慢加热到硝酸挥尽,继续浓缩到2～3mL ,放冷,用水转入25mL 容量瓶,过滤,即得,同时做空白。
213 标准溶液的配制及标准曲线 精密吸取1000μg•mL - 1的镉标准液1mL 于100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀释至刻度,配成浓度为10μg •mL - 1 镉标准液; 精密吸取4mL 于100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀释至刻度,配成浓度为014μg•mL - 1镉标准液;再分别吸取014μg•mL - 1 镉标准液0 ,012 ,015 ,110 ,115 ,210mL ,分别置100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀释至刻度,配成浓度为0 ,018 ,210 ,410 ,610 ,810ng•mL - 1的镉标准系列溶液,在已设定的仪器条件下测定,以浓度(C) 为横坐标,吸收值(A) 为纵坐标进行回归,方程为A = 010551 ×C + 010949 ,r = 0199938 , (n = 6) 。
215 精密度试验 精密吸取011μg•mL - 1镉标准液2mL 置于100mL 量瓶中,用011mol•L - 1 硝酸溶液稀释至刻度,摇匀,在已设定的仪器条件下测定,重复5 次,测得镉的吸光度的RSD 为1155 % (见表3) ,表明仪器精密度良好。
216 稳定性试验 将同一镉标准液在相同仪器条件下,分别于0 ,2 ,4 ,6 ,8 ,16 和24 h 重复测定,测得镉的吸光度的RSD为0163 %(见表4) ,表明镉在24 h 内测定结果稳定。
217 重复性试验 按样品测定项下方法,对同一批号样品(070801) ,分别取样平行测定5 次,求得镉含量的相对标准偏差RSD 为2109 % , 1 、2 、3 、4 、5 次的镉含量(ppm) 分别为0156 、0153 、0154 、0154 、0155 ,表明重复性较好。
218 加样回收试验 验精密称取约015g 明目地黄胶囊内容物,加入Cd 标准液,按“213”项下方法依次操作,进样20μL ,以Cd 的吸光度值代入回归方程计算回收率,平均回收率为 95138 % ,RSD 为210 %(n = 5) 。
219 样品测定 取明目地黄胶囊3批,分别精密称取约015g内容物于消解罐中,按“213”项下方法依次操作,进样20μL ,以镉的吸光度值代入回归方程计算含量,结果3 个样品批号为070801 、070802 、070803 的镉含量(ppm) 分别为0154 、0156 、0152 。 3 讨论
311 石墨炉原子吸收法与火焰原子吸收法相比,具有灵敏度高,试样用量小等优点,尤其适合痕量元素的分析。石墨炉法测定前处理简便,结果准确,精密度好�；鹧娣ㄇ按硪玫郊谆於⊥腿�,毒性较大,而石墨炉法不需用有机溶剂萃取。石墨炉法检出限最低为4 ×10 - 13 g , 上机检测达μg•kg - 1 ,火焰法上机检测为mg•kg - 1 。故本方法选用石墨炉原子吸收法进行测量
312 由于明目地黄胶囊包括的药材比较复杂,在测定中产生强烈的背景干扰,因此要尽可能多地除掉基体物质,减少基体干扰。镉属于低温挥发性元素,在灰化阶段易损失,加基体改进剂后,可以提高镉的灰化温度,在原子化阶段分解为金属原子而不致损失。镉的基体改进剂有硝酸、重铬酸钾、磷酸铵、磷酸二氢铵、硝酸铵、硝酸镁等。对不同的基体改进剂进行了试验,选择硝酸镁作为测定镉的基体改进剂。并且在选定的优化条件下,提高灰化温度,可以有效地消除了背景干扰,改善了原子化吸收峰,提高了灵敏度,使结果更加准确。
313 本实验对不同量的硝酸及过氧化氢用量组合进行了分析。结果发现,随着硝酸使用量的增加,样品消化越完全。但是硝酸的残留越多对测定结果影响很大。因此,微波消解后, 一定要尽量全部去掉消解液中残留的硝酸,否则会导致结果不准, 并缩短石墨管的寿命, 经过试验, 我们选定加硝酸5mL ,过氧化氢2mL ,达到了比较理想的效果。
314 以上结果表明利用微波消解处理样品,使得样品的前处理过程大大缩短,且节省试剂。减少环境污染,方法准确,灵敏快速,非常适合用于明目地黄胶囊中镉金属元素的测定分析。
